我想使用内部测试来检查样品负载是否相同,但我没有找到适合内部参考的蛋白质。

我做了许多膜蛋白。当时没有经典的内部参考NA / KATPASE,所以我尝试使用beta-axtin作为内部参考来节省时间和金钱。乐队很清楚。我们使用的β肌动蛋白抗体仍然在中国生产。
用经典的冲孔试剂盒提取膜蛋白。应该说膜蛋白的提取效果非常好。
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我做了许多膜蛋白。当时没有经典的内部参考NA / KATPASE,所以我尝试使用beta-axtin作为内部参考来节省时间和金钱。乐队很清楚。我们使用的β肌动蛋白抗体仍然在中国生产。
用经典的冲孔试剂盒提取膜蛋白。应该说膜蛋白的提取效果非常好。
所以你仍然可以制造β-肌动蛋白。
所以我想:1。
膜蛋白的纯度不能100%纯,必须包括细胞质或细胞内的细胞器蛋白。
2
β-肌动蛋白的表达水平丰富,其结构和理化性质稳定,易于实施。
3
业主也使用这种类型的产品来生产使用β-肌动蛋白作为内部参考的膜蛋白,即使起始点不用于产生内部参数而是用于确认纯度。我说有。
另一方面,这反映了消除β-肌动蛋白的困难。
基于以上三点,我认为实际上可以使用β肌动蛋白作为内部参考,2。
我们发现β-肌动蛋白和GAPDH在细胞质中表达。膜不得含有该组分,不能用作内标。它可用于检测所提出的膜蛋白是否纯净。膜蛋白也提取物理方法(密度离心,双水相)或化学方法(几种KITs),提取的膜蛋白不能完全纯净,60-70%你可以达到当然,可以孵育带,因为它还可以包括细胞内细胞器的膜。
关于质膜标记蛋白,即NA / K ATP酶(整合的膜蛋白),这是毫无疑问的(一些整联蛋白也是可用的)。它可以用作内部参考的事实取决于这些蛋白质是否仍然处于变化过程中。如果是这样,它是内部参考。如果系统不同并且彼此不相互影响,则它们只能被视为外部参考。
使用NA / K ATP酶,Na,K-ATP酶,正常免疫反应性,BPH和PC-卡宁前列腺的定量分析提供文献中的参考文献。
与奶油相比,进行A组图像分析的分析结果,并且使用针对Ka的α1亚基(Kα-ATP酶)的环状抗体在免疫测定部分中激活KαATP的表达水平。在关键的安全条件下。
小组乐队C.用于分析的代表性部分。
PanelDandE; Na,K-ATP图谱被绘制为BPH和PCasections的资金来源。